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改善骨健康的组合物、食品及应用的制作方法

来源: 浏览: 5次  更新时间:2021-12-02 06:09

革新骨兴盛的拉拢物、食物及运用的创造办法

本创造属于养分补充剂本领范围简直波及一种革新骨兴盛的拉拢物、食物及运用。



背景本领:

钙和维生素d有帮骨骼兴盛的效率已纳入gb28050食物宁靖国度尺度是被公认的凭据充溢的健骨元素睿智导航是被公认的凭据充溢的健骨元素想要在钙和维生素d的前提上达到进一步明显普及的效验是格外艰巨的。姑且尔国儿童膳食形式中钙和维生素d摄入存留严沉不及的情景。其他钙养分情景不良的其他人群比方华夏50-64岁、65岁中暮年人群钙摄入量平稳为415mg和409mg该年纪段人群钙的rni值为1000mg表示着其钙摄入情景仅达需要量的1/3安排即也存留钙摄入严沉不及的情景。因此亟需研制一种新的不妨明显革新骨兴盛的产品。



本领实行因素:

本创造的手段在于供给一种革新骨兴盛的拉拢物该拉拢物在革新成长久动物以及其他成长阶段钙摄入不及的动物骨密度、骨钙含量、骨微瞅构造方面实行了明显逐级增效的本领效验。

本创造的再一个手段在于供给一种包括上述拉拢物的食物。

本创造的另一个手段在于供给上述拉拢物大概食物在革新动物的骨密度、骨钙含量和骨微瞅构造中的一种大概多种的运用。

依据本创造的一个方面供给一种革新骨兴盛的拉拢物所述拉拢物包括本料组分:钙源、维生素d以及益生元个中所述益生元包括聚葡萄糖和矮聚半乳糖以所包括的灵验物质计所述聚葡萄糖和所述矮聚半乳糖的沉量比为(1-15):1。

依据本创造的一个方面个中以所包括的灵验物质计所述聚葡萄糖和所述矮聚半乳糖的沉量比为(3-6):1。

优选地所述拉拢物包括如下沉量份的养分因素:钙12万-66万份维生素d1-7份聚葡萄糖266万-2240万份和矮聚半乳糖67万-560万份。

优选地所述钙源包括醋酸钙、酪蛋白钙、氯化钙、柠檬酸钙、柠檬酸钙、柠檬酸苹果酸钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、苹果酸钙、磷酸氢钙、磷酸二氢钙、磷酸钙、硫酸钙、抗坏血酸钙、甘油磷酸钙和乳钙。

优选地所述聚葡萄糖符合食物宁靖国度尺度gb25541-2010。个中所述聚葡萄糖的平稳会合度为8-16纯度>90%。所述矮聚半乳糖包括半乳矮聚二糖到半乳矮聚八糖以搞基计纯度>57%。

依据本创造的一个方面供给了包括上述拉拢物的食物。

优选地所述食物选自乳品、保健食物和休闲食物中的起码一种。

依据本创造的另一方面供给了上述拉拢物大概包括上述拉拢物的食物在革新动物的骨密度、骨钙含量和骨微瞅构造中的一种大概多种的运用。

优选地所述骨微瞅构造选自骨小梁数目、骨小梁分别度和骨体积分数中的起码一种。

优选地所述动物选自成长久动物以及成长久之外其他成长阶段钙摄入不及的动物;优选地所述动物为哺乳动物。

优选地所述成长久动物为成长久儿童;所述成长久之外其他成长阶段钙摄入不及的动物为钙摄入不及的人类优选为钙摄入不及的中暮年人群。

本创造所供给的拉拢物中各组分:钙、维生素d、聚葡萄糖(pdx)和矮聚半乳糖(gox)以及各组分的含量及配比(钙含量、维生素含量、pdx+gos总量及pdx+gos中聚葡萄糖和矮聚半乳糖比率)博得了预见之外的兴盛效验如减少成长久动物以及成长久之外其他成长阶段钙摄入不及的动物的骨密度、减少骨钙含量、革新骨微瞅构造(减少骨小梁数目、缩小骨小梁分别度、减少骨体积分数)。

附图证明

图1为本创造实行例1的大鼠骨密度成像表示图;

图2为本创造实行例1的各组大鼠股骨远端的横断面micro-ct代表性图像。

简直实行办法

为了更加领会地领会本创造的本领特性、手段和有益效验现闭于本创造的本领筹备进前进一步的留神证明。应领会以下简直实行办法仅是示例性的本创造的本领筹备不限于以下所陈设的简直实行办法。

本创造供给了一种革新骨兴盛的拉拢物所述拉拢物包括本料组分:钙源、维生素d以及益生元。个中所述益生元包括聚葡萄糖和矮聚半乳糖以所包括的灵验物质计所述聚葡萄糖和所述矮聚半乳糖的沉量比为(1-15)∶1优选(3-6)∶1进一步优选为4∶1。

上述钙源包括醋酸钙、酪蛋白钙、氯化钙、柠檬酸钙、柠檬酸钙、柠檬酸苹果酸钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、苹果酸钙、磷酸氢钙、磷酸二氢钙、磷酸钙、硫酸钙、抗坏血酸钙、甘油磷酸钙和乳钙。

上述聚葡萄糖符合食物宁靖国度尺度gb25541-2010。个中所述聚葡萄糖的平稳会合度为8-16纯度>90%。所述矮聚半乳糖包括半乳矮聚二糖到半乳矮聚八糖以搞基计纯度>57%。

依据一个简直实行办法所述拉拢物包括如下沉量份的养分因素:钙12万-66万份维生素d1-7份聚葡萄糖266万-2240万份和矮聚半乳糖67万-560万份。

本创造还供给了一种包括上述拉拢物的食物。将上述各组分混共后运用于百般食物如乳品、保健食物和休闲食物。简直为液态乳、调制乳、酸奶、奶酪、奶粉、固体饮料、方便食物、糖果和保健品中从而实行革新华夏儿童及钙摄入不及人群骨兴盛的本领效验。

本创造还供给了上述拉拢物大概包括上述拉拢物的食物在革新动物的骨密度、骨钙含量和骨微瞅构造中的一种大概多种的运用。

上述骨微瞅构造选自骨小梁数目、骨小梁分别度和骨体积分数中的起码一种。

上述动物选自成长久动物以及成长久之外其他成长阶段钙摄入不及的动物;优选地所述动物为哺乳动物。

上述成长久动物为成长久儿童;所述成长久之外其他成长阶段钙摄入不及的动物为钙摄入不及的人类优选为钙摄入不及的中暮年人群。

综上所述本创造所供给的拉拢物具备以下便宜:

上述拉拢物中的各组分:钙+维生素d+聚葡萄糖+矮聚半乳糖拉拢(聚葡萄糖∶矮聚半乳糖=4∶1)运用于成长久动物的效验明显优于更高剂量钙组、共剂量钙+维生素d组、其他比率钙+维生素d+pdx+gos拉拢(聚葡萄糖∶矮聚半乳糖=1∶1)组效验表姑且减少骨钙含量、减少骨密度、减少骨小梁数目、缩小骨小梁分别度、减少骨体积分数。

为使本创造的手段、本领筹备和便宜更加领会精确以下共同简直实行例闭于本创勉强进一步的留神证明。

下述实行例中所用办法如无特别证明均为常规办法所用的试剂如无特别证明均为可商购的试剂。

华夏3-6岁7-9岁10-13岁儿童钙摄入量平稳惟有318mg334mg和390mg而举荐摄入量(rni)值分别为800mg1000mg和1200mg。所以本创造建立了钙摄入量仅占举荐量1/3的成长久动物模型睿智导航1000mg和1200mg。所以本创造建立了钙摄入量仅占举荐量1/3的成长久动物模型拟合华夏儿童钙养分情景经过3个月的矮钙饲料豢养代表从3-12岁的成长久该模型动物表展现了矮钙情景下闭于骨骼兴好意景的背后效率包括骨钙含量矮、骨密度矮、骨体积分数矮、骨小梁数目缩小、骨小梁间距增大。

本创造供给了高钙组闭于矮钙养分情景下成长久动物的骨骼兴盛革新效率高钙组钙剂量补充到了成长久动物的举荐理念剂量。

本创造供给了钙+维生素d闭于矮钙养分情景下成长久动物的骨骼兴盛革新效率补充后钙剂量为高钙组的3/4维生素d剂量为矮钙组和高钙组的1.48倍。

本创造供给了钙+维生素d+pdx+gos拉拢(聚葡萄糖∶矮聚半乳糖=1∶1)闭于矮钙养分情景下成长久动物的骨骼兴盛革新效率补充后钙剂量为高钙组的3/4维生素d剂量为矮钙组和高钙组的1.5倍pdx+gos拉拢中聚葡萄糖和矮聚半乳糖沉量比为1∶1pdx+gos儿童运用剂量为0.3-0.78g/kg.bw。

本创造供给了钙+维生素d+pdx+gos拉拢(聚葡萄糖∶矮聚半乳糖=4∶1)闭于矮钙养分情景下成长久动物的骨骼兴盛革新效率补充后钙剂量为高钙组的3/4维生素d剂量为矮钙组和高钙组的1.5倍pdx+gos拉拢中聚葡萄糖和矮聚半乳糖沉量比为4∶1pdx+gos儿童运用剂量为0.3-0.78g/kg.bw。

经过以上组其他闭于比本创造钙+维生素d+pdx+gos拉拢(聚葡萄糖∶矮聚半乳糖=4∶1)在普及骨钙含量、普及骨密度、普及骨小梁数目、缩小骨小梁间距、减少骨体积分数方面明显优于高钙组、钙+维生素d组、钙+维生素d+pdx+gos拉拢(聚葡萄糖∶矮聚半乳糖=1∶1)组。

实行例

实行例1

考查动物与分组:

spf级断乳sd大鼠144只雄性体沉45g~65g购自北京维通利华试验动物本领有限公司动物合格证号scxk(京)2016-0006。动物豢养于四川大学华西大众卫生学院障碍级动物房合格证号syxk(川)2018-011。豢养中保护动物自在饮水和充溢进食饮水为灭菌纯水。大鼠豢养在底部为无锈钢铁丝的笼具中动物房内保护宁静、干洁、透气和符合光照状况20-26℃湿度40%~70%明暗代替周期为12h。

大鼠由ain-93g尺度饲料(南通特诺菲饲料科技有限公司消费答应证号:苏饲证((2019)06092)符合性豢养2周。将大鼠按体沉随机分成5组每组12只。钙、维生素d3、矮聚半乳糖(gos)、聚葡萄糖(pdx)的赋予均采用拌饲的办法试验分组睹表1各组饲料配方睹表2。十脚拌饲处置均在动物符合性豢养后连接进行93天于试验第93天正法动物并进行各目标检测。

表1

注:1μg维生素d3=40iu维生素d3上述各组分均以各组分纯度沉量计。

表2

注:表2中维生素d3的沉量以本料沉量计本猜中维生素d3的纯度为0.25%。

闭于上述各组分的逐日摄入量与沉量份之间的换算办法如下:

1沉量份=0.78ug/天摄入量简直到如下每个组分的逐日摄入量为:

(1)实行例1中矮钙组为平常钙组1/3拟合华夏3-12岁儿童钙养分情景搞预组中钙的补充量为补充至平常须要量的3/4达到了胜过预期的效验。以3-12岁儿童计逐日钙的补充量为282-510mg/d以1-3次/天计钙的范畴为:94mg-510mg/d。此数值以纯钙计若钙源不共则需依据钙源的纯度及含钙量再估计本创造不限钙源故只以纯钙量进行保护。

(2)实行例1中维生素d3的补充量为膳食摄入量的1.48倍。华夏儿童3-6、7-9、10-12岁儿童膳食维生素d3的摄入量为5.24ug、4.89ug、5.85ug。以3-12岁儿童计逐日维生素d3的补充量为2.35-5ug/d以1-3次/天计维生素d3的范畴为:0.78-5ug/d。

(3)依据实行例1大鼠体沉、摄食量换算益生元(pdx+gos)的人体摄食剂量为0.52g/kg.bw。须要证明的是试验初期饲料树立益生元剂量为5g/100g膳食大鼠展示腹泻情景故0.52g/kg.bw为创造腹泻后饲料下调了1/3益生元剂量依据大鼠成长过程中体沉、摄食量换算益生元剂量保护范畴为0.3-0.78g/kg.bw。华夏3-12岁儿童体沉均值范畴约15-42kg故益生元优选剂量为:7.8g-21.8g/d以1-3次/天计益生元总剂量为2.6g-21.8g/d个中pdx∶gos沉量比为4∶1。须要证明的是益生元剂量以pdx和gos纯品计。

试验办法

动物处置及样品收集

结果一次灌胃后大鼠禁食16h水自在饮用。大鼠经麻醉后腹腔静脉取血。用断颈法正法大鼠。血液样品经4℃3500r/min离心10min分别血清后接收上清液。血清存于-80℃待尝试时取出。

将大鼠正法后分别双侧股骨剔除骨表面附着的肌肉和软构造等剥离出双侧股骨。左侧股骨于105℃烘箱中烘搞。右侧股骨用4%多聚甲醛固定36h而后浸泡于70%的酒精保持于4℃冰箱直至ct扫描。

股骨沉、股骨长、骨钙和骨密度测定

股骨沉和股骨长测定

左侧股骨于105℃烘箱中烘搞至恒沉后记录股骨搞沉测量股骨长。

骨钙测定

烘搞至恒沉的左侧股骨置于坩埚中小火加热炭化至无烟变化至马弗炉中于550℃灰化3h~4h。冷却取出用浓硝酸消解定容至25ml取40ul至10ml比色管加1ml的20%硝酸镧溶液定容到10ml摇匀后用火光本子接收光谱仪测定。

骨密度测定

micro-ct扫描中断后的大鼠右侧股骨采用德国brukerdxspro型小动物全自动高分别率x光机测定每只大鼠股骨中端的骨密度屡屡共时成像10根大鼠股骨像素分别率为10μmx射线灯管电压为45kvp曝光时间设为1min。扫描截止如图1所示。

micro-ct检测

大鼠右侧股骨采用美国perkinelmer公司的小动物活体micro-ct印象体系扫描。采用quantumgxmicroctimagingsystem软件领会。扫描参数树立如下:树立视线为36mm体素72μm能量80kv强度100μa扫描时间14min。扫描数据经三维沉建后闭于普遍个样品扫描赢得512弛不共截面的图片后树立感风趣地区(roi)为从成长层以下0.5mm起50弛)。将扫描数据用软件沉建降后行参数进行领会。骨密度的矫正采用perkinelmer公司供给的树脂包埋羟基磷灰石固体校准模型进行分别估计roi地区内的皮质骨、骨松质及十脚骨密度。其他领会参数包括骨体积分数(bonevolume/totalvolumebv/tv)、骨小梁厚度(trabecularthicknesstb.th)、骨小梁数目(trabecularnumbertb.n)和骨小梁分别度(trabecularseparationtb.sp)。

数据处置和截止判决

十脚数据用均数士尺度差(mean±sd)展现。采用spss26.0统计软件进行单因素方差领会。领会前进步行方差齐性锻炼方差齐估计f值。若f值<f0.05p>0.05展现各组均数分别无统计学道理;若f值>f0.05p<0.05表明各组均数间分别有统计学道理。多个试验组和闭于照组之间均数的二二比较办法除体沉采用dunnett-t的比较办法之外其他采用lsd进行领会。

试验截止

图2示出了各组大鼠股骨远端的横断面micro-ct代表性图像;表3示出了各组股骨微瞅构造micro-ct扫描截止;表4示出了各受试物股骨常规目目标效率(mean+sd)。图2中胫骨骨骺线下方白色网状局部为骨小梁。矮钙组即第1组骨小梁数目起码最为荒凉骨小梁间距增宽。平常组(2)和各搞预组(3-5)的骨小梁彼此对接成搜集小梁间距缩小简直数据在表3中展现。

表3

表4

由图2表3和表4试验截止不妨瞅出本创造所述拉拢物钙+维生素d+pdx+gos优选比率拉拢(pdx∶gos=4∶1)不妨明显革新成长久动物骨兴好意景包括减少骨钙含量、减少骨密度、减少骨小梁数目、缩小骨小梁间距、减少骨体积分数其效验明显优于高钙剂量组、共剂量钙+维生素d组、共剂量钙+维生素d+pdx+gos拉拢(pdx∶gos=1∶1)组。

以上所述只是是本创造的优选实行办法。该当指出的是在不摆脱本创造的精力和本质的情景下本范围本领人员可闭于本创造的细节和特性进行百般建改、拉拢、变换大概替代。这些建改、拉拢、变换大概替代也应领会为包括在本创造乞求保护的范畴之内。

TAG标签: 动物 维生素 创造 拉拢


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