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一种高稳定性的蛋白多肽-纳米硒及其制备方法与应用与流程 (长期补硒有副作用吗)

来源: 浏览: 19次  更新时间:2021-12-02 00:11

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纳米硒的功效与作用

一种高宁静性的蛋白多肽-纳米硒及其制备办法与运用与过程
一种高宁静性的蛋白多肽

纳米硒及其制备办法与运用
本领范围
1.本创造属于纳米硒本领范围更加波及一种高宁静性的蛋白多肽

纳米硒及其制备办法。


背景本领:

2.硒是一种人体必定的微量元素是人体内多种酶的构成因素东方优秀网站目录大全 网址分类导航网 网是人体内多种酶的构成因素而且是产生人体多种硒蛋白及硒半胱氨酸的的必定膳食因素闭于人的成长发育具备至闭沉要的效率可帮帮人们保护免疫力、抗单薄和保卫疾病等。人体缺乏硒元素会引导糖尿病、贫血病、闭节炎等多种疾病的爆发严沉妨害人体兴盛。
3.顽固补硒普遍采用根源于食物的有机硒大概无机硒。个中无机硒的毒性大且接收率矮而有机硒在生物体中天生要经过一个较长且不易控的生物变化过程也有必定的潜伏宁靖隐患。纳米硒是一种运用纳米本领制备而成的新型研成品具备很高的生物活性而且与无机硒和有机硒比拟它具备高接收率、矮毒宁靖、可安排免疫和抗氧化本能高档便宜。然而纳米硒也有其缺点它的理化本质不宁静具备较高的表面自在能容易团员极易变化为无活性的玄色单质硒而且这种玄色单质硒几乎不有益活性然而却能爆发毒性这极地面妨碍了纳米硒动作补硒产品的展开运用。
4.因此憧憬提出一种宁静性更高的纳米硒产品以更好的表现纳米硒的效率。


本领实行因素:

5.本创造旨在起码处理上述现有本领中存留的本领问题之一。为此本创造提出一种高宁静性的蛋白多肽

纳米硒及其制备办法所述蛋白多肽

纳米硒的粒径较小且宁静性高不易爆发团员局面具备杰出的可运费用和活性。
6.本创造供给一种蛋白多肽

纳米硒的制备办法包括以下办法:
7.将大豆多肽液与纳米硒溶液混共反应制得蛋白多肽

纳米硒;所述大豆多肽液中大豆多肽的分子量为10

30kda。
8.为了克服现有纳米硒产品的缺点与不及本创造以大豆多肽动作宁静剂创造大豆多肽闭于纳米硒的宁静效验与其分子量有接近相闭性当大豆多肽的分子量为10

30kda时所制得的大豆多肽

纳米硒颗粒不只粒径相闭于较小且共时具备相当崇高的宁静性效验从而不妨大大普及纳米硒的可运费用。除此之外比拟于其他品种的蛋白多肽本创造所运用的大豆多肽更容易被人体所接收还具备抗氧化、降血压、降血脂、抗癌等多种心理功效活性不妨与纳米硒协共爆发更好的保健效验。
9.优选的所述大豆多肽液中大豆多肽的浓度为0.25

2.5mg/ml。当大豆多肽的浓度为0.25

2.5mg/ml时所制得的大豆多肽

纳米硒不妨具备更好的电位宁静性不妨万古间保护较高的电位绝闭于值。
10.更优选的所述大豆多肽液中大豆多肽的浓度为2.5mg/ml。
11.优选的所述大豆多肽的制备办法为:将大豆分别蛋白与水混共介入碱性蛋白酶
进行酶解分别纯化赢顺利段分子量的大豆多肽。
12.更优选的所述分别纯化的办法包括离心大概超滤分级中的起码一种。最优选的所述分别纯化的办法为超滤分级。
13.更优选的所述碱性蛋白酶为alcalase酶。
14.更优选的所述酶解的前提为:ph=10.0温度55℃。
15.优选的所述纳米硒溶液的制备办法为:将半胱氨酸和亚硒酸钠在溶液中混共经氧化还本反应赢得纳米硒溶液。个中所述溶液中所用溶剂优选为水。
16.更优选的所述半胱氨酸与所述亚硒酸钠的浓度比约为4:1。当半胱氨酸和亚硒酸钠的浓度比约为4:1时所赢得纳米硒的粒径和粒径分别指数(pdi)都较小本能杰出。
17.更优选的进行所述氧化还本反应时的ph值安排至约为8。当ph值约为8时所赢得纳米硒的粒径和粒径分别指数(pdi)都较小本能杰出。
18.本创造还供给了一种蛋白多肽

纳米硒由上述制备办法所制得。
19.本创造还供给了上述一种蛋白多肽

纳米硒在补硒产品中的运用。
20.相闭于于现有本领本创造的有益效验如下:
21.(1)本创造以半胱氨酸动作还本剂还本亚硒酸钠赢得纳米硒颗粒而半胱氨酸是人体的一种非必定氨基酸闭于人体有益无害此合成办法宁靖环保不会爆发闭于人体有害物质。因为纳米硒格外不宁静和难以分别且分别的过程会引导纳米硒氧化形成灰色大概玄色的无活性单质硒而遗失运用价格因此本创造以纳米硒溶液的办法闭于其进行保持有用处保护纳米硒的宁静性;
22.(2)本创造以大豆分别蛋白酶解赢得的大豆多肽为纳米硒的宁静剂不只保护了纳米硒的宁静性而且大豆多肽自己具备的心理功效活性和易被人体接收的个性会闭于纳米硒的功效和接收有进一步提高;
23.(3)本创造先制备出纳米硒溶液而后再用大豆多肽液来宁静纳米硒颗粒比拟于在大豆多肽液中直接介入硒源和还本剂的办法制备纳米硒颗粒本创造所述制备办法更有用处纳米硒小颗粒的产生及宁静性的普及;
24.(4)本创造指出大豆多肽的分子量大小闭于于纳米硒的宁静性有着沉要效率且分子量为10

30kda的大豆多肽闭于于保护纳米硒的宁静性的效验最佳不妨灵验克服纳米硒颗粒易团员的缺点大大普及了纳米硒的可运费用促成纳米硒代替无机硒和有机硒在补硒产品中的运用。
附图证明
25.图1为不共半胱氨酸与亚硒酸钠浓度比下制备的纳米硒的粒径和粒径分别指数(pdi);
26.图2为不共反应ph值下制备的纳米硒的粒径和粒径分别指数(pdi);
27.图3为不共浓度下的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4℃贮躲时的粒径、粒径分别指数(pdi)和电位图;
28.图4为不共浓度下的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4℃贮躲的表面变革图;
29.图5为不共分子量的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4
℃贮躲的粒径变革图和21黎明的粒径分别图;
30.图6为不共分子量的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4℃贮躲45黎明的表面图;
31.图7为不共分子量的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒的透射电子显微镜(tem)图。
简直实行办法
32.为了让本范围本领人员更加领会精确本创造所述本领筹备漳州等八闽新闻促成纳米硒代替无机硒和有机硒在补硒产品中的运用。
附图证明
25.图1为不共半胱氨酸与亚硒酸钠浓度比下制备的纳米硒的粒径和粒径分别指数(pdi);
26.图2为不共反应ph值下制备的纳米硒的粒径和粒径分别指数(pdi);
27.图3为不共浓度下的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4℃贮躲时的粒径、粒径分别指数(pdi)和电位图;
28.图4为不共浓度下的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4℃贮躲的表面变革图;
29.图5为不共分子量的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4
℃贮躲的粒径变革图和21黎明的粒径分别图;
30.图6为不共分子量的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒于4℃贮躲45黎明的表面图;
31.图7为不共分子量的大豆多肽液与纳米硒溶液反应后赢得的大豆多肽

纳米硒的透射电子显微镜(tem)图。
简直实行办法
32.为了让本范围本领人员更加领会精确本创造所述本领筹备现陈设以下实行例进行证明。须要指出的是以下实行例仅为本创造的优选实行例闭于本创造乞求的保护范畴不产生节创造用所有未违反本创造的精力本质和本理下所干出的建改、代替、拉拢均包括在本创造的保护范畴内。
33.以下实行例中所用的本料、试剂大概安装如无特别证明均可从常规贸易道路赢得大概者不妨经过现有已知办法赢得。
34.实行例1
35.制备纳米硒溶液时半胱氨酸与亚硒酸钠的最佳浓度比
36.控制ph=4分别按半胱氨酸:亚硒酸钠=1:1、2:1、4:1、6:1、8:1的浓度比等体积混共半胱氨酸水溶液和亚硒酸钠水溶液充溢反应赢得纳米硒溶液。
37.经过纳米粒度仪测得在不共半胱氨酸与亚硒酸钠浓度比前提下所制得纳米硒溶液中纳米硒颗粒的粒径和粒径分别指数(pdi)。尝试截止如图1所示当半胱氨酸与亚硒酸钠的浓度比为4:1时所赢得纳米硒颗粒的粒径和pdi都较小个中粒径小于100nmpdi小于0.2。
38.实行例2
39.制备纳米硒溶液时的最佳反应ph值
40.以实行例1所赢得的最佳浓度比等体积混共半胱氨酸水溶液和亚硒酸钠水溶液(半胱氨酸:亚硒酸钠=4:1)分别安排溶液ph=2、4、6、8、10充溢反应赢得纳米硒溶液。
41.经过纳米粒度仪测得在不共ph值前提下所制得纳米硒溶液中纳米硒颗粒的粒径和粒径分别指数(pdi)。尝试截止如图2所示当ph为8时所赢得纳米硒颗粒的粒径和pdi都较小个中粒径小于200nmpdi小于0.25。
42.实行例3
43.大豆多肽液中大豆多肽的最佳浓度范畴
44.大豆多肽sp1的制备:取5g的大豆分别蛋白溶于100ml蒸馏水中制成浓度为5%(w/v)的大豆分别蛋白溶液而后在80℃下水浴15min。后安排水浴锅温度至55℃用0.1mol/l的氢氧化钠安排大豆分别蛋白溶液ph值至10而后介入0.25ml alcalase酶酶解过程中每隔10min用0.1mol/l naoh滴定至ph=10。酶解完成后沸水浴10min灭酶。而后在4000g、20℃下离心15min后离心去积淀即得大豆多肽水解液。将水解液进行真空浓缩、冷冻搞燥即得大豆混共肽粉末(sp1)。
45.取以上制得的大豆多肽sp1溶于去离子水分别摆设成浓度为40、20、10、5、2.5、1、0.5、0.25mg/ml的大豆多肽液采用实行例1

2所决定的半胱氨酸与亚硒酸钠的最佳浓度比和最佳反应ph值制得纳米硒溶液以上述大豆多肽液和纳米硒溶液为本料按纳米硒溶液:
大豆多肽液=6:1的体积比进行充溢混共反应制得大豆多肽

纳米硒溶液于4℃下贮躲。
46.经过纳米粒度仪测得大豆多肽

纳米硒溶液随时间变革的粒径、pdi、电位及表面变革尝试截止如图3

4所示。由图3中a可知方才制备好的大豆多肽

纳米硒颗粒粒径在85nm安排。在14天内跟着贮躲时间蔓延介入了大豆多肽动作宁静剂的大豆多肽

纳米硒的粒径也不明显变革。由图3中b可知经过14天的贮躲后惟有介入了浓度为0.25

2.5mg/ml大豆多肽的大豆多肽

纳米硒的电位绝闭于值依然在30mv以上。蔓延贮躲时间至30天时从图4可知在0.25

2.5mg/ml的浓度范畴内惟有介入了2.5mg/ml大豆多肽的大豆多肽

纳米硒溶液未展示明显积淀。从以上领会不妨得出增添大豆多肽的最佳浓度为2.5mg/ml。
47.实行例4
48.大豆多肽的最佳分子量大小
49.大豆多肽sp2的制备:取5g的大豆分别蛋白溶于100ml蒸馏水中制成浓度为5%(w/v)的大豆分别蛋白溶液而后在80℃下水浴15min。后安排水浴锅温度至55℃用0.1mol/l的氢氧化钠安排大豆分别蛋白溶液ph值至10而后介入0.25ml alcalase酶酶解过程中每隔10min用0.1mol/l naoh滴定至ph=10。酶解完成后沸水浴10min灭酶。而后在4000g、20℃下离心15min后去积淀即得大豆多肽水解液。将水解液经过扣留分子量为3kda的超滤膜赢得分子量小于3kda的大豆多肽水解液将水解液真空浓缩、冷冻搞燥赢得的分子量小于3kda的大豆多肽粉末(sp2)。
50.大豆多肽sp3的制备:取5g的大豆分别蛋白溶于100ml蒸馏水中制成浓度为5%(w/v)的大豆分别蛋白溶液而后在80℃下水浴15min。后安排水浴锅温度至55℃用0.1mol/l的氢氧化钠安排大豆分别蛋白溶液ph值至10而后介入0.25ml alcalase酶酶解过程中每隔10min用0.1mol/l naoh滴定至ph=10。酶解完成后沸水浴10min灭酶。而后在4000g、20℃下离心15min后去积淀即得大豆多肽水解液。将水解液经过扣留分子量为5kda和3kda的超滤膜赢得分子量在3

5kda之间的大豆多肽水解液将水解液真空浓缩、冷冻搞燥赢得的分子量在3

5kda之间的大豆多肽粉末(sp3)。
51.大豆多肽sp4的制备:取5g的大豆分别蛋白溶于100ml蒸馏水中制成浓度为5%(w/v)的大豆分别蛋白溶液而后在80℃下水浴15min。后安排水浴锅温度至55℃漳州等八闽新闻而后在80℃下水浴15min。后安排水浴锅温度至55℃用0.1mol/l的氢氧化钠安排大豆分别蛋白溶液ph值至10而后介入0.25ml alcalase酶酶解过程中每隔10min用0.1mol/l naoh滴定至ph=10。酶解完成后沸水浴10min灭酶。而后在4000g、20℃下离心15min后去积淀即得大豆多肽水解液。将水解液经过扣留分子量为10kda和5kda的超滤膜赢得分子量在5

10kda之间的大豆多肽水解液将水解液真空浓缩、冷冻搞燥赢得的分子量在5

10kda之间的大豆多肽粉末(sp4)。
52.大豆多肽sp5的制备:取5g的大豆分别蛋白溶于100ml蒸馏水中制成浓度为5%(w/v)的大豆分别蛋白溶液而后在80℃下水浴15min。后安排水浴锅温度至55℃用0.1mol/l的氢氧化钠安排大豆分别蛋白溶液ph值至10而后介入0.25ml alcalase酶酶解过程中每隔10min用0.1mol/l naoh滴定至ph=10。酶解完成后沸水浴10min灭酶。而后在4000g、20℃下离心15min后去积淀即得大豆多肽水解液。将水解液经过扣留分子量为10kda的超滤膜赢得分子量大于10kda的大豆多肽水解液将水解液真空浓缩、冷冻搞燥赢得的分子量大于10kda大豆多肽粉末(sp5)。
53.大豆多肽

纳米硒溶液的制备:
54.以实行例3

4所制得的大豆多肽sp1

sp5为本料分别将上述大豆多肽溶于去离子水各自摆设成浓度为2.5mg/ml的大豆多肽液;采用实行例1

2所决定的半胱氨酸与亚硒酸钠的最佳浓度比和最佳反应ph值制得纳米硒溶液以上述大豆多肽液和纳米硒溶液为本料按纳米硒溶液:大豆多肽液=6:1的体积比进行充溢混共反应即制得闭于应的大豆多肽

纳米硒溶液(sp1

senps、sp2

senps、sp3

senps、sp4

senps、sp5

senps)将制得的大豆多肽

纳米硒溶液于4℃下贮躲。
55.经过纳米粒度仪测得上述5种大豆多肽

纳米硒溶液随时间变革的粒径及30黎明的粒径分别和表面图尝试截止如图5

6所示。经过透射电子显微镜(tem)参瞅上述5种大豆多肽

纳米硒溶液的描写尝试截止如图7所示。
56.由图5中a可知经检测分子量大于10kda的大豆多肽

纳米硒(sp5

senps)随贮躲时间的蔓延粒径变革较小其他分子量的大豆多肽

纳米硒的粒径都在第21天时展示了较明显增大。从图5中b也不妨瞅出sp5

senps的粒径分别会合在100nm安排而其他的多肽纳米硒在胜过1000nm处还有分别证明sp5

senps的宁静性较好而其他的大豆多肽

纳米硒都展示了不共程度的团员。由图6可知当大豆多肽

纳米硒在4℃下贮躲至45天时未增加肽的纳米硒(空白组)已经展示了明显的黑血色积淀sp2

senps、sp3

senps、sp4

senps也都展示了不共程度的血色积淀惟有sp1

senps和sp5

senps的积淀较少。由图7不妨瞅出本创造所制备的大豆多肽

纳米硒颗粒呈球状而惟有sp5

senps的球形大小均匀且不展示会合局面。以上截止表明大豆多肽的分子量闭于纳米硒颗粒的宁静性有着沉要效率分子量≥10kda(sp5)的大豆多肽闭于于保护纳米硒宁静性的效验明显更好然而出于本质运用考量大豆多肽的分子量应不大于30kda。
57.上头共同附图闭于本本领实行例作了留神证明然而是本本领不限于上述实行例在所属本领范围普遍本领人员所具备的知识范畴内还不妨在不摆脱本本领计划的前提下作出百般变革。其他在不辩论的情景下本本领的实行例及实行例中的特性不妨彼此拉拢。

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