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一种睡莲花细胞水的制备方法以及睡莲花细胞水的应用与流程

来源: 浏览:6次  更新时间:2021-10-21 17:19

一种睡莲花细胞水的制备办法以及睡莲花细胞水的运用与过程

1.本创造波及农产品处置本领范围特别是波及一种睡莲花细胞水的制备办法以及睡莲花细胞水的运用。


背景本领:

2.睡莲多年生水生草本手机阿里巴巴网站多年生水生草本根状茎肥厚从东北至云南西至新疆皆有分别往鲜日本印度俄罗斯北美等。生于沼泽、湖泊等静水水体中。许多花圃水体培植动作参瞅植物根状茎食用大概酿酒又入药能治小儿缓惊风;全草可作绿肥。试验探究表明睡莲闭于沉金属具备吸附效率。睡莲浸出液闭于铜绿微囊藻的成长有必定的压创造用展现为明显的矮促高抑局面。依据闭于睡莲的养分因素领会截止表明睡莲富含17种氨基酸睡莲蛋白属优质蛋白。领会截止还表明睡莲含有丰厚的vc、黄酮甙、微量元素锌这二者协共具备很强的排铅功效。动物急性毒性试验、微核考查及精子畸变试验都表明睡莲是一种平稳固当无所有毒副效率物质。睡莲花粉养分丰厚具备实脚性、平稳性、浓缩性等特性是具备开拓运用远景的天然养分源。
3.现阶段睡莲花的重要提取办法有蒸馏法、浸提法、超临界二氧化碳萃取法蒸馏法耗费时间较长、且能耗较大而其他二种办法而介入了其他溶剂节制了睡莲花提取物的保持和运用。
4.酶解法也常用于植物细胞液的提取中。华夏博利请求cn109730948a果然了一种采用超声矮温旋蒸法和酶法相共同制备牡丹鲜花细胞水的办法:开始经过抑制法赢得榨汁和残渣1再将残渣1旋蒸赢得细胞水1和残渣2结果将残渣2进行酶解再旋蒸赢得细胞水3。将榨汁、细胞水1/2混共后赢得高收率牡丹花细胞水。该办法具备较高的提取效力然而是具犹如下缺点:(1)采用抑制法后与真空提取法赢得的液体混共如许会戴入多糖、色素和刺激气息引导防腐和褪色问题;(2)工艺后期协共其他植物所有蒸馏处理防腐问题然而是容易变化本有的牡丹花细胞水因素和缓息!后期消费也无法控制本质。


本领实行因素:

5.本创造的手段在于克服上述本领缺点供给一种睡莲花细胞水的提取办法赢得的睡莲花细胞水具备70多种蒸发性活性因素具备寒冷怡人的甜香味性状为无色通明液体。
6.本创造是经过以下本领筹备实行的:
7.一种睡莲花细胞水的制备办法包括以下办法:不介入溶剂将睡莲花在30℃-55℃、压力-70kpa~-101kpa下发端提取睡莲花细胞水产生蒸气并冷凝收集液体提取1-3小时赢得初提细胞水和初提睡莲花残渣;在初提细胞水中介入初始睡莲花总品质为基准的0.2-0.4%的纤维素酶和0-0.1%果胶酶再将初提细胞水介入初提睡莲花残渣中在35℃-50℃、压力-80kpa~-101kpa前提下再次提取3-7小时提取中断收集赢得睡莲花细胞水。
8.发端提取时间是闭头参数之一假如时间太短提取出的睡莲花细胞水过少介入
酶后细胞水很难潮湿睡莲花表面引导酶解不行平常进行。假如发端提取时间过长细胞水流出过多降矮了后续提取效力也减少了酶解时间戴来过度酶解的危害。本创造经过在初提细胞水中介入必定量的酶再次加入容器中闭于睡莲花残渣进行提取具犹如下有益便宜。第一、初提细胞水表面弛力矮浸透性好;第二、初提细胞水ph为3-7无需特殊安排ph有用处普及酶活性;第三、酶解不妨加快破壁;第四、矮温真空本领。经过四种效力的协共不妨在较矮温度(35-50℃)下控制酶解速度加快细胞液流出速度。再次提取办法中的前1小时安排会蒸撤除倒回容器内的初提细胞水加快酶解速度中断酶解的时长(此时初提液体的几便至闭沉要多了会蔓延酶解时间少了会中断酶解时间)也制止了顽固酶解法须要介入洪量的水稀释细胞液以及酶解过度戴来的刺激气息。
9.闭于初提液体的浸透性经过试验创造当采用细胞液动作溶剂法的溶剂提取睡莲花残渣时不妨戴出洪量的黄酮和多糖等大分子物质以及易蒸发活性因素。比拟采用纯水动作溶剂细胞水动作溶剂不妨提取出更多的黄酮和多糖等活性因素。
10.优选的所述的初提阶段的温度为40℃-50℃压力为-80kpa~-101kpa。
11.优选的再次提取时间为3.5小时-5小时。
12.因为睡莲花瓣较薄因此将再次提取时间不妨压缩至5小时以内。
13.在提取过程中进行搅拌搅拌速度为1-150转/分钟。
14.收集过程中进行冷凝温度为-10~8℃。
15.所述的睡莲花选自睡莲花花瓣采用怪僻无霉变、无腐败的。不妨是怪僻的广西横县睡莲花鲜嫩多汁水洗过后无附着杂质。普遍的睡莲花采摘后7天内还不妨保护怪僻大概者是经过冷冻等防腐处置的睡莲花不妨保持长达数月时间。
16.经过本创造办法赢得的睡莲花细胞水运用用于护肤品、食物、保健品等。细胞水中含有70多种蒸发性活性因素(重要经过气质联用gc-ms)高本质实用于高端、高附加值运用。
17.本创造与现有本领比拟具犹如下有益效验:
18.本创造先经过矮温真空提取本领先提取必定量的细胞液而后运用初提细胞液的高浸透性介入酶后再次提取睡莲花残渣。不妨加快细胞水的提取效力制止了顽固酶解法戴来的酶解过度问题比拟于矮温真空提取本领不妨赢得更多的活性因素以及更多的睡莲花细胞液。经过本创造赢得的睡莲花细胞水本质高:澄清通明、纯度高、寒冷怡人的甜香味(70多种活性因素)具备抗氧化、抗炎功效无需增添所有外来防腐剂也能起到自己防腐效率。而且睡莲花细胞水中不含有多糖和黄酮宁静性好。
附图证明
19.图1:实行例1人睡莲花细胞水宁靖性尝试截止图。
简直实行办法
20.底下共同简直实行例闭于本创造进行留神证明。以下实行例将有帮于本范围的本领人员进一步领会本创造然而不以所有办法节制本创造。该当指出的是闭于本范围的普遍本领人员来说在不摆脱本创造构想的前提下还不妨干出若搞变形和矫正。这些都属于本创造的保护范畴。
21.本创造实行例和闭于比率所用睡莲花花瓣为怪僻无霉变的将睡莲花花瓣洗洁沥搞水分降后行提取试验。
22.实行例1:将50kg睡莲花花瓣加入容器中不介入所有溶剂在50℃、-100kpa下发端提取睡莲花细胞水产生蒸气后冷凝收集液体(冷凝温度为-5℃)提取2小时赢得初提细胞水和初提睡莲花残渣;在初提细胞水中介入100g纤维素酶和50g果胶酶再将初提细胞水介入初提睡莲花残渣中在40℃、压力-90kpa前提下再次提取全程搅拌为60转/分4.5小时提取中断收集赢得睡莲花细胞水。沉量36kg细胞液澄清通明寒冷怡人的甜香味。
23.实行例2:将50kg睡莲花花瓣加入容器中不介入所有溶剂在35℃、-90kpa下发端提取睡莲花细胞水产生蒸气后冷凝收集液体(冷凝温度为-5℃)提取2.5小时赢得初提细胞水和初提睡莲花残渣;在初提细胞水中介入150g纤维素酶和30g果胶酶再将初提细胞水介入初提睡莲花残渣中在40℃、压力-90kpa前提下再次提取全程搅拌为60转/分5小时提取中断收集赢得睡莲花细胞水。沉量36.8kg细胞液澄清通明寒冷怡人的甜香味。
24.实行例3:将50kg睡莲花花瓣加入容器中不介入所有溶剂在45℃、-95kpa下发端提取睡莲花细胞水产生蒸气后冷凝收集液体(冷凝温度为-5℃)提取3小时赢得初提细胞水和初提睡莲花残渣;在初提细胞水中介入120g纤维素酶和40g果胶酶再将初提细胞水介入初提睡莲花残渣中在45℃、压力-90kpa前提下再次提取全程搅拌为60转/分6小时提取中断收集赢得睡莲花细胞水。沉量38.1kg细胞液澄清通明寒冷怡人的甜香味。
25.闭于比率1:将50kg睡莲花花瓣加入容器中不介入所有溶剂在55℃、-80kpa下提取细胞水产生蒸气后冷凝收集液体全程搅拌为60转/分提取6.5小时赢得睡莲花细胞水。35.4kg澄清通明甜香味平淡。
26.闭于比率2:将50kg睡莲花花瓣加入容器中与5kg水、120g纤维素酶和40g果胶酶混共后在50℃搅拌45分钟后在50℃、压力-100kpa下提取睡莲花细胞水产生蒸气后冷凝收集液体(冷凝温度为-5℃)全程搅拌为60转/分提取6小时收集赢得42.5kg睡莲花细胞水含细胞液中有5kg水)液体浅色通明平淡的甜香味混有少许异味。
27.闭于比率3:将50kg睡莲花花瓣加入容器中与5kg水、200g纤维素酶和80g果胶酶混共后在50℃下提取全程搅拌为60转/分提取6小时过滤(双沉过滤:先离心计过滤在采用0.22um滤膜过滤)后收集赢得44.1kg睡莲花细胞水(细胞液中含有5kg水)细胞液中悬浮有少许渺小物体而且异味沉。
28.实行例和闭于比率工艺截止领会:
29.由闭于比率1可知仅采用矮温真空提取本领提取到的细胞液沉量矮而且因素较少气息较淡。由闭于比率2可知比拟于闭于比率1中介入必定量的酶与水减少了酶解时间不只本质提取量须要减去5kg而且会引导细胞液浓度降矮如需赢得更高浓度则须要蒸馏提纯如许会引导其他易蒸发有机物的破坏。由闭于比率3可知由现有本领的酶提取法赢得的睡莲花细胞水中含有洪量的多糖和黄酮以及其他有色杂质含有较沉的异味共时因为特殊介入了5kg水倒在细胞液浓度矮价格不高。
30.表1:实行例和闭于比率所提取睡莲花细胞液检测截止
[0031][0032]
各项尝试办法:
[0033]
(1)睡莲花细胞水活性因素领会:在80℃进样温度下进行顶氛围质检测。
[0034]
1.仪器信息:
[0035]
agilent 7980a gc;
[0036]
ms:5975c;
[0037]
50/30μm car/pdms/dvb萃取纤维头美国supelco公司。
[0038]
2.gc-ms前提:
[0039]
色谱柱为hp-innowax毛细管柱子(30m
×
0.25mm
×
0.25μm);载气为he流速1ml/min分别比5:1;进样温度为250℃;升温步调为开始温度为40℃保护5min以8℃/min升至250℃保护5min。
[0040]
质谱前提:ei电离源能量70ev;离子源温度230℃四极杆温度150℃接口温度250℃扫描范畴30-400m/z。
[0041]
3.样品前处置:
[0042]
将5ml样品、1g nacl置于20ml顶空瓶中拧紧瓶盖。于搅拌形式80℃下平稳5min后用固相微萃取针80℃下萃取5min而后于进样口领会5min。
[0043]
表2:实行例1睡莲花细胞水活性因素表(相闭于含量少而且配合度矮的组分不陈设)
[0044]
[0045]
[0046][0047]
(2)睡莲花细胞水宁靖性测
[0048]
hacat细胞为人长生表皮细胞系闭于hacat细胞的细胞毒性可动作闭于皮肤宁靖性的参照数据。平常细胞代谢振奋其线粒体内的琥珀酸脱氢酶可将四唑盐类物质还本为戴脸色的结晶状物质积聚在细胞四周该变革可经过酶标仪读取od值经过od值与空白闭于照组的比较不妨得悉细胞的相闭于成长情景。
[0049]
实行例1睡莲花细胞水宁靖性尝试截止睹附图1。
[0050]
(3)实行例1睡莲花细胞水抗氧化本能
[0051]
采用dpph自在基驱除法依据dpph分子中存留的宁静氮自在基其醇溶液呈深紫色且在517nm四周有强接收。当有自在基驱除剂存留时分子中的单电子因配闭于而使其接收渐渐消逝其褪色程度与其接收的电子数目成定量闭系因此可经过测定其最大接收波长517nm处的吸光度的缩小来定量领会自在基驱除本领测定样品的抗氧化功效。截止如下表所示。
[0052]
睡莲花细胞水浓度(%)dpph驱除率/%2015402150266030804610051
[0053]
经过上表中的数据不妨瞅出睡莲花细胞水具备杰出的抗氧化功效。
[0054]
(4)实行例1睡莲花细胞水抗炎功效
[0055]
睡莲花细胞水中活性因素较多个中具备抗菌消炎因素比较明显如苯甲醇、水杨酸甲酯等因此闭于其进行抗炎功效的尝试。
[0056]
脂多糖是革兰氏阴性菌细胞壁的重要因素,它不妨激活巨噬细胞开释多种炎性细胞因子因此运用脂多糖(lps)刺激小鼠单核-巨噬细胞树立体外炎症反应模型样品进行搞预以及采用地塞米松为阳性闭于照采用酶联免疫法(elisa)测定炎症因子il-6和tnf-α的程度变革从而计划样品的体外抗炎效率。
[0057]
将睡莲花细胞水本液配制成不共的浓度进行尝试尝试截止如下表。
[0058]
睡莲花细胞水浓度il-6(pg/ml)tnf-α(pg/ml)100%2615080%2615540%3116515%3917010%421745%47196空白25150lps刺激50260地塞米松45206
[0059]
从上表中可得悉80%浓度的睡莲花细胞水可使皮肤受lps刺激后il-6表白因子降到平常范畴具备明显抗炎的效率;而100%浓度的睡莲花细胞水可使受lps刺激后的皮肤的tnf-α表白因子低沉到平常范畴内。
[0060]
(5)实行例1睡莲花细胞水保持前提尝试
[0061]
睡莲花细胞水中活性因素较多为预防个中菌类成长引导产本品质低沉因此何如样保持格外沉要。本文闭于实行例1睡莲花细胞水中介入必定量防腐剂苯氧乙醇在室温、4℃二各类保持前提下的理化值和菌类成长情景进行了为期一个月的检测。
[0062]
1)室温不加防腐剂
[0063][0064]
2)4℃不加防腐剂
[0065][0066]
3)室温加防腐剂
[0067]
[0068]
4)4℃加防腐剂
[0069][0070]
由以上数据得悉室温不加防腐剂的睡莲花细胞水较容易成长细菌4℃不加防腐剂的睡莲花细胞水电导率稍增大然而微检在尺度范畴内介入必定量防腐剂的睡莲花细胞水在室温、4℃下存放理化数据宁静微生物菌降总额达标。综上4℃不加防腐剂、室温加防腐剂、4℃加防腐剂三种前提皆符合睡莲花细胞水的保持为保障起睹倡导4℃、室温下介入必定量防腐剂前提下保持较为妥当。

TAG标签: 细胞 莲花 提取 初提


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